O teste de endotoxina bacteriana (BET) é realizado na maioria dos laboratórios modernos sob condições controladas como fator importante para evitar interferências.
Apropriadotécnica assépticaé importante ao preparar e diluir padrões e manusear amostras.Vestirprática fora do equipamento de proteção individual normal do laboratório (EPI) não é uma preocupação, a menos que o produto sob teste exija considerações específicas de segurança do analista devido à toxicidade ou infecciosidade.Luvasdeve ser isento de TALC, pois o TALC pode conter níveis significativos de endotoxinas.Leitores de placas, banhos-maria e blocos de calor secousado para incubação de amostras deve estar em uma bancada de laboratório, longe de dutos de aquecimento, ventilação e ar condicionado (HVAC), vibração significativa e tráfego de laboratório que possa afetar os resultados do teste.Exemplos de tempos e condições de esperadevem ser determinados e posteriormente documentados, se necessário, para garantir que resultados de testes precisos possam ser gerados no tempo qualificado.
Por exemplo, se o laboratório receber uma amostra de Água para Injeção (WFI) ou em processo, ela deverá ser refrigerada ou poderá permanecer em temperatura ambiente e por quanto tempo?Antes do teste, recomenda-se que o(s) recipiente(s) de amostra primário(s) seja(m) adequadamente misturado(s) antes de remover a(s) alíquota(s) de teste para teste direto ou diluição subsequente.
Teste de endotoxina bacteriana Bioendo, os experimentos incluemmétodo de coágulo de gelensaio de teste de endotoxina eensaio quantitativo de teste de endotoxina, o ensaio de teste de endotoxina do método de coágulo de gel é a detecção qualitativa de endotoxina, esse experimento requer que os consumíveis sejam o processamento de despirogenação, como tubos de reação livres de endotoxina, tubos de diluição e pontas livres de pirogênio;a detecção quantitativa de endotoxina tem teste cinético de endotoxina cromogênica, teste cinético turbidimétrico de endotoxina, esse experimento requer que os consumíveis tenham que atender ao nível superior de endotoxinas inferior a0,005EU/ml(0,001EU/ml), como tubos livres de endotoxinas, pontas livres de pirogênios e microplacas livres de pirogênios, até mesmo reservatórios livres de pirogênios.A propósito, se for tratamento de amostras, o recipiente deverá ser o frasco de amostra livre de endotoxinas.
Nos testes de endotoxinas, a interferência pode surgir de diversas fontes, como componentes da matriz da amostra, reagentes de teste ou equipamentos.
Para evitar interferência no experimento, as seguintes medidas podem ser tomadas:
1. Preparação da amostra: A preparação adequada da amostra é essencial para testes precisos de endotoxinas.
A matriz da amostra deve ser exaustivamente testada e otimizada para garantir a compatibilidade com o ensaio de endotoxina.
Em particular, as substâncias interferentes, como os lípidos e as proteínas, devem ser removidas ou minimizadas através de técnicas adequadas, como a filtração ou a centrifugação.
2. Controles Positivos e Negativos: É essencial incluir controles positivos e negativos no ensaio para monitorar interferências.
Os controles positivos confirmam a funcionalidade do teste, enquanto os controles negativos detectam qualquer contaminação ou interferência dos componentes do ensaio.
3. Controle de qualidade: O controle de qualidade deve ser realizado em todos os reagentes, equipamentos e água utilizados no ensaio.
Isso garante que os reagentes estejam livres de contaminação por endotoxinas e funcionem corretamente.
4. Padronização: O ensaio deve ser padronizado para garantir que todos os resultados sejam comparáveis e reprodutíveis.
Isto envolve o uso de uma curva padrão para calibrar o ensaio e o uso de técnicas padronizadas para preparação, incubação e detecção de amostras.
5. Validação: O ensaio deve ser validado para garantir que é específico, sensível e confiável.
Isso envolve testar uma variedade de amostras, incluindo aquelas que contêm endotoxinas, para determinar a exatidão e precisão do ensaio.
Seguindo essas medidas, a interferência pode ser minimizada e testes precisos de endotoxinas podem ser alcançados.
Horário da postagem: 01 de dezembro de 2022
