Ensaio de teste de endotoxina por lisado de amebócito liofilizado (reagente LAL)

Ensaio de teste de endotoxina por lisado de amebócito liofilizado (reagente LAL)

Reagentes LAL: O lisado de amebócitos liofilizado (LAL) é um extrato aquoso de células sanguíneas (amebócitos) do caranguejo-ferradura do Atlântico.
Reagentes TAL: O reagente TAL é um extrato aquoso de células sanguíneas de Tachypleus tridentatus.
Atualmente, a principal produção de reagentes LAL/TAL está nos Estados Unidos e na China.

Ensaio de teste de endotoxina de coágulo de gel, este método ainda tem as principais aplicações em todo o mundo, a fim de atender aos requisitos de segurança dos medicamentos injetáveis ​​​​em humanos.
ATUALMENTE a Bioendo produz e fornece reagente LAL de coágulo de gel, incluindo ampolas de vidro de teste único e frascos de múltiplos testes.
https://www.bioendo.com/gel-clot-endotoxin-assay/G01, GS44, G02, G17 e G52
Esta é a solução econômica para detecção qualitativa de endotoxinas em testes de drogas.Especialmente para medicamentos injetáveis ​​ou parenterais para testar endotoxinas em WFI, API ou medicamentos acabados.O ensaio de teste de endotoxina é uma alta demanda de ações operacionais, precisa de um operador proficiente para lidar com o ensaio de coágulo de gel para garantir os resultados corretos.

Uma solução completa paraG52Ensaio de teste de endotoxina:
Reagente LAL
Controle de endotoxina padrão
APOSTA Água
Pontas de pipeta sem endotoxinas
Tubos de vidro isentos de endotoxinas, incluindo tubos de operação de diluição e reação.
Instrumento de incubação, recomenda-se o banho-maria ou incubadora de calor seco.Todos os dispositivos de incubação exigem precisão de temperatura.
Todos os consumíveis devem atingir o ensaio LAL que atende ao padrão de nível livre de endotoxinas ”<0,005EU/ml”.
O ambiente experimental deverá ser adequado à detecção de endotoxinas.

Prestar atenção em :
Consumíveis de plástico, como pontas de pipetas ou placas multipoços, são amplamente utilizados para testes de endotoxinas.As Farmacopeias Harmonizadas (USP/CP) exigem que quaisquer consumíveis de plástico e tubos de vidro estejam livres de endotoxina detectável e igualmente importante, mas muitas vezes não considerados, devem seguir o padrão de livre de fatores interferentes.

Como operar o ensaio de teste de endotoxina para detectar as endotoxinas na amostra?
Em primeiro lugar, deve ser realizado o teste para confirmação da sensibilidade do lisado marcado.Para confirmar a sensibilidade é a mesma das marcas da etiqueta.
Para análise de amostras, realize ensaios de teste de endotoxina pré-interferência.
Para operar o ensaio completo de endotoxina do “teste de interferência”.
Operar o teste limite para saber como está o nível de endotoxinas na amostra.

Ao operar o teste para confirmação da sensibilidade do lisado rotulado, o resultado é anormal, 2 Lamada não tem formação de gel?
Verifique se o método de preparação da endotoxina padrão de controle bacteriano está correto.
A mistura em vórtice é necessária para cada diluente (consulte o manual de instruções ou o folheto informativo da endotoxina padrão de controle em detalhes).
Para verificar se o reagente do lisado corresponde à endotoxina padrão de controle.

Recomenda-se usar um banho-maria ou uma incubadora de calor seco para o processo de temperatura constante do reagente lisado (por exemplo, uma incubadora ou uma caixa seca não são eficazes).
Durante a incubação, o ambiente aquático do banho-maria é estático e estável, todas as vibrações são evitadas.
Preste atenção especial ao banho-maria para desligar a bomba de fluxo de água.

A julgar o resultado, retire suavemente o tubo de ensaio ou a ampola de vidro do termostato, inverta lentamente 180 graus,
a formação de gel no tubo não será deformada e não escorregará, o resultado foi registrado pelo sinal “+”;
nenhuma formação de gel é formada ou o coágulo de gel não pode ser mantido intacto mesmo que esteja formado.
O escorregamento da parede é negativo, o resultado foi registrado pelo sinal “-”.
O kit de teste rápido de endotoxina de coágulo de gel pertence ao método de teste de endotoxina de coágulo de gel.
No teste rápido de endotoxina de coágulo de gel, o controle positivo da amostra não gera gel?
Primeiro, use água de teste de endotoxina bacteriana para verificar os reagentes do lisado, garantir que os operadores e o meio ambiente cumpram os regulamentos;

Se o kit for qualificado, então o controle positivo da amostra não forma gel devido ao efeito inibitório da amostra, e a amostra deve ser processada e tratada.
O método de processamento de amostra mais comum é a diluição.