O que é teste de endotoxinas?
As endotoxinas são moléculas hidrofóbicas que fazem parte do complexo lipopolissacarídeo que forma a maior parte da membrana externa das bactérias Gram-negativas.Eles são liberados quando as bactérias morrem e suas membranas externas se desintegram.As endotoxinas são consideradas os principais contribuintes para a resposta pirogênica.E produtos parenterais contaminados com pirogênios podem levar ao desenvolvimento de febre, indução de resposta inflamatória, choque, falência de órgãos e morte em humanos.
O teste de endotoxinas é o teste para detectar ou quantificar endotoxinas de bactérias Gram-negativas.
Os coelhos são empregados para detectar e quantificar endotoxinas em produtos farmacêuticos inicialmente.Segundo a USP, o RPT envolve o monitoramento de aumento de temperatura ou febre após injeção intravenosa do fármaco em coelhos.E 21 CFR 610.13(b) exige um teste de pirogênio em coelhos para produtos biológicos específicos.
Na década de 1960, Fredrick Bang e Jack Levin descobriram que os amebócitos do caranguejo-ferradura coagulam na presença de endotoxinas.OLisado de amebócito Limulus(ou Lisado de Amebócito Tachypleus) foi desenvolvido em conformidade para substituir a maioria dos RPT.Na USP, o teste LAL é conhecido como teste de endotoxina bacteriana (BET).E o BET poderia ser feito usando 3 técnicas: 1) a técnica gel-clot;2) a técnica turbidimétrica;3)a técnica cromogênica.Os requisitos para o teste LAL incluem pH ideal, força iônica, temperatura e tempo de incubação.
Comparado com o RPT, o BET é rápido e eficiente.No entanto, o BET não conseguiu substituir completamente o RPT.Porque o ensaio LAL pode sofrer interferência de fatores e é incapaz de detectar pirogênios não-endotoxinas.
Horário da postagem: 29 de dezembro de 2018
