Aplicação da técnica cromogênica ao teste de endotoxinas bacterianas

A técnica cromogênica está entre as três técnicas que também contêm técnica de gel-coágulo e técnica turbidimétrica para detectar ou quantificar endotoxinas de bactérias Gram-negativas usando lisado de amebócitos extraído do sangue azul do caranguejo-ferradura (Limulus polyphemus ou Tachypleus tridentatus).Ele poderia ser classificado como um ensaio cromogênico final ou um ensaio cinético-cromogênico com base no princípio de ensaio específico empregado.

O princípio da reação é o seguinte: o lisado de amebócitos contém uma cascata de enzimas serina protease (pró-enzimas) que podem ser ativadas por endotoxinas bacterianas.As endotoxinas ativam as pró-enzimas para produzir enzimas ativadas (denominadas coagulase), esta última catalisa a divisão do substrato incolor, liberando um produto de cor amarela pNA.O pNA liberado pode ser medido fotometricamente a 405 nm.E a absorvância está positivamente correlacionada com a concentração de endotoxina, então a concentração de endotoxina pode ser quantificada em conformidade.


Horário da postagem: 29 de setembro de 2019